文章目录

1 材料和方法

1.1 试验材料

1.2 PnSMO1.1基因的克隆及表达载体构建

1.3 子房注射法转化裂叶牵牛

1.4 pRI-PnSMO1.1基因整合及表达的检测

1.5 不同NaCl浓度条件下转基因裂叶牵牛生长的测定

1.6 不同NaCl浓度条件下转基因裂叶牵牛叶片丙二醛含量的测定

1.7 不同NaCl浓度条件下转基因裂叶牵牛叶细胞液相对电导率的测定

1.8 不同NaCl浓度条件下转基因裂叶牵牛叶油菜素内脂物质含量的测定

1.9 统计分析

2 结果与分析

2.1 子房注射法对裂叶牵牛进行遗传转化结果分析

2.2 目的基因在T1转基因裂叶牵牛中的PCR结果

2.3 不同浓度NaCl条件下转基因裂叶牵牛的生长

2.4 不同NaCl浓度处理下裂叶牵牛各株系叶片丙二醛的含量

2.5 不同NaCl浓度处理下裂叶牵牛各株系叶片细胞电导率

2.6 不同NaCl浓度处理下裂叶牵牛各株系叶油菜素内脂的含量

3 讨论

文章摘要:外源施加植物甾醇衍生物-油菜素内脂的信号物质可以显著提高植物的耐盐性。为了检测过表达编码植物固醇关键酶的smo基因是否能提高目标植物的盐胁迫耐受性,当前研究工作使用子房注射法。首先将植物甾醇生物合成过程中关键酶-甲基甾醇单加氧酶的编码PnSMO1.1基因转移到裂叶牵牛中,构建了该基因的过表达转基因株系。接着以经PCR鉴定验证的转基因植物株系幼苗为实验材料,在0～200 mmol/L梯度NaCl处理条件下,检测了不同株系植物的根长和下胚轴长度等生长参数,以及叶片细胞中丙二醛（MDA）的含量、相对电导率、油菜素甾酮和6-脱氧油菜素甾酮含量等生理指标。结果显示,在100～250 mmol/L NaCl处理下,与野生型（WT）植株或空质粒转化对照（BL）植株相比,过表达PnSMO1.1显著增加了转化植株的根和下胚轴的相对生长量,增强了转基因株系的耐盐性。另外,与WT和BL幼苗相比,在不同的NaCl浓度处理条件下,转基因株系中6-脱氧油菜素甾酮的积累显著增加,但相对电导率（rEC）值、油菜素甾酮的积累量或MDA含量均显著降低。盐渍化、干旱和低温等事件的发生,严重抑制了植物的营养生长和产量。这些结果揭示;过表达PnSMO1.1基因,可以通过调节细胞内的油菜素内脂化合物积累量的动态,进而保护质膜的结构完整性,显著提高转基因植物的耐盐性。

文章关键词:

论文分类号:S681.6